Kit di rilevamento degli anticorpi neutralizzanti SARS-CoV-2 (ELISA) di Testsealabs
Breve descrizione:
La cassetta per il test degli anticorpi neutralizzanti SARS-CoV-2 è un test immunocromatografico rapido. Questo test è progettato per la rilevazione qualitativa di anticorpi neutralizzanti contro la malattia da Coronavirus 2019. Può essere utilizzato con campioni di sangue intero umano, siero o plasma. Il test funge da ausilio nella valutazione dei livelli di titoli anticorpali neutralizzanti umani anti-nuovo coronavirus.
 Risultati rapidi: accurati come in laboratorio in pochi minuti | Precisione di livello da laboratorio: affidabile e degna di fiducia |
| Test ovunque: non è richiesta alcuna visita di laboratorio | Qualità certificata: 13485, CE, conforme a Mdsap |
| Semplice e ottimizzato: facile da usare, senza problemi | Massima comodità: esegui i test comodamente a casa |
【PRINCIPIO】
Il kit di rilevamento degli anticorpi neutralizzanti SARS-CoV-2 si basa sulla metodologia ELISA competitiva.
Utilizzando il dominio di legame del recettore purificato (RBD), la proteina della proteina spike virale (S) e la cellula ospite
recettore ACE2, questo test è progettato per imitare l'interazione neutralizzante virus-ospite.
I calibratori, i controlli di qualità e i campioni di siero o plasma vengono miscelati individualmente e accuratamente in diluizione.
tampone contenente coniugato hACE2-HRP aliquotato in piccole provette. Quindi le miscele vengono trasferite in
i pozzetti della micropiastra contenenti il frammento RBD (RBD) ricombinante SARS-CoV-2 immobilizzato per
incubazione. Durante l'incubazione di 30 minuti, l'anticorpo specifico RBD nei calibratori, QC e
i campioni competeranno con l'hACE2-HRP per il legame specifico con l'RBD immobilizzato nei pozzetti. Dopo
l'incubazione, i pozzetti vengono lavati 4 volte per rimuovere il coniugato hACE2-HRP non legato. Una soluzione di
Il TMB viene quindi aggiunto e incubato per 20 minuti a temperatura ambiente, con conseguente sviluppo di un
colore blu. Lo sviluppo del colore viene interrotto con l'aggiunta di HCl 1N e l'assorbanza è
misurata spettrofotometricamente a 450 nm. L'intensità del colore formato è proporzionale alla
quantità di enzima presente ed è inversamente proporzionale alla quantità di standard analizzati nello stesso modo.
Attraverso il confronto con la curva di calibrazione formata dai calibratori forniti, la concentrazione di
vengono quindi calcolati gli anticorpi neutralizzanti nel campione sconosciuto.
【MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI】
1. Acqua distillata o deionizzata
2. Pipette di precisione: 10μL, 100μL, 200μL e 1 mL
3. Puntali per pipette monouso
4. Lettore di micropiastre in grado di leggere l'assorbanza a 450 nm.
5. Carta assorbente
6. Carta millimetrata
7. Miscelatore Vortex o equivalente
【RACCOLTA E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI】
1. Per questo kit è possibile utilizzare campioni di siero e plasma raccolti in provette contenenti K2-EDTA.
2. I campioni devono essere tappati e possono essere conservati fino a 48 ore a una temperatura compresa tra 2 °C e 8 °C prima dell'analisi.
I campioni conservati per un periodo di tempo più lungo (fino a 6 mesi) devono essere congelati solo una volta a -20 °C prima dell'analisi.
Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.
PROTOCOLLO
【Preparazione del reagente】
1. Tutti i reagenti devono essere tolti dal frigorifero e lasciati tornare a temperatura ambiente prima dell'uso
(da 20° a 25°C). Conservare tutti i reagenti in frigorifero subito dopo l'uso.
2. Tutti i campioni e i controlli devono essere agitati con vortex prima dell'uso.
3. Preparazione della soluzione hACE2-HRP: diluire il concentrato hACE2-HRP con un rapporto di diluizione di 1:51 con Diluizione
Tampone. Ad esempio, diluire 100 μL di concentrato hACE2-HRP con 5,0 mL di tampone di diluizione HRP per
creare una soluzione hACE2-HRP.
4. Preparazione della soluzione di lavaggio 1×: diluire la soluzione di lavaggio 20× con acqua deionizzata o distillata con un
rapporto di volume di 1:19. Ad esempio, diluire 20 mL di soluzione di lavaggio 20× con 380 mL di acqua deionizzata o
acqua distillata per preparare 400 ml di soluzione di lavaggio 1×.
【Procedura di prova】
1. In provette separate, prelevare 120 μL della soluzione hACE2-HRP preparata.
2. Aggiungere 6 μL di calibratori, campioni sconosciuti e controlli di qualità in ogni provetta e mescolare bene.
3. Trasferire 100 μL di ciascuna miscela preparata nel passaggio 2 nei corrispondenti pozzetti della micropiastra secondo
alla configurazione di test predefinita.
3. Coprire la piastra con il sigillante per piastre e incubare a 37°C per 30 minuti.
4. Rimuovere il sigillante per piastre e lavare la piastra con circa 300 μL di soluzione di lavaggio 1× per pozzetto per quattro volte.
5. Dopo il lavaggio, picchiettare la piastra su un tovagliolo di carta per rimuovere il liquido residuo nei pozzetti.
6. Aggiungere 100 μL di soluzione TMB a ciascun pozzetto e incubare la piastra al buio a 20-25°C per 20 minuti.
7. Aggiungere 50 μL di soluzione bloccante a ciascun pozzetto per interrompere la reazione.
8. Leggere l'assorbanza nel lettore di micropiastre a 450 nm entro 10 minuti (630 nm come accessorio è
consigliato per prestazioni di precisione più elevate).