Κιτ ανίχνευσης εξουδετερωτικών αντισωμάτων SARS-CoV-2 (ELISA) Testsealabs
Σύντομη Περιγραφή:
Η κασέτα δοκιμής εξουδετερωτικών αντισωμάτων SARS-CoV-2 είναι μια ταχεία χρωματογραφική ανοσοδοκιμασία. Αυτή η δοκιμασία έχει σχεδιαστεί για την ποιοτική ανίχνευση εξουδετερωτικών αντισωμάτων κατά της νόσου του Κορονοϊού 2019. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί με δείγματα ανθρώπινου ολικού αίματος, ορού ή πλάσματος. Η δοκιμή χρησιμεύει ως βοήθημα στην αξιολόγηση των επιπέδων των τίτλων ανθρώπινων εξουδετερωτικών αντισωμάτων κατά του νέου κορονοϊού.
 Γρήγορα Αποτελέσματα: Ακριβή Εργαστηρίου σε Λεπτά | Ακρίβεια εργαστηριακού επιπέδου: Αξιόπιστη και έμπιστη |
| Εξέταση οπουδήποτε: Δεν απαιτείται επίσκεψη στο εργαστήριο | Πιστοποιημένη Ποιότητα: 13485, CE, Συμβατό με Mdsap |
| Απλό & Βελτιστοποιημένο: Εύκολο στη χρήση, χωρίς προβλήματα | Απόλυτη άνεση: Κάντε το τεστ άνετα στο σπίτι |
【ΑΡΧΗ】
Το κιτ ανίχνευσης εξουδετερωτικών αντισωμάτων SARS-CoV-2 βασίζεται σε ανταγωνιστική μεθοδολογία ELISA.
Χρησιμοποιώντας καθαρισμένη περιοχή δέσμευσης υποδοχέα (RBD), πρωτεΐνη από την πρωτεΐνη ιικής ακίδας (S) και το κύτταρο ξενιστή
υποδοχέα ACE2, αυτή η δοκιμή έχει σχεδιαστεί για να μιμείται την εξουδετερωτική αλληλεπίδραση ιού-ξενιστή.
Οι βαθμονομητές, οι ποιοτικοί έλεγχοι και τα δείγματα ορού ή πλάσματος αναμειγνύονται καλά σε αραίωση.
ρυθμιστικό διάλυμα που περιέχει σύζευγμα hACE2-HRP, χωρισμένο σε μικρά σωληνάρια. Στη συνέχεια, τα μείγματα μεταφέρονται σε
τα φρεάτια μικροπλάκας που περιέχουν ακινητοποιημένο ανασυνδυασμένο θραύσμα RBD (RBD) του SARS-CoV-2 για
επώαση. Κατά τη διάρκεια της επώασης των 30 λεπτών, το ειδικό για την RBD αντίσωμα στους βαθμονομητές, τον ποιοτικό έλεγχο και
Τα δείγματα θα ανταγωνίζονται την hACE2-HRP για ειδική σύνδεση με την RBD που ακινητοποιείται στα φρεάτια. Μετά
κατά την επώαση, τα φρεάτια πλένονται 4 φορές για την απομάκρυνση του μη συνδεδεμένου συζυγούς hACE2-HRP. Ένα διάλυμα
Στη συνέχεια προστίθεται TMB και επωάζεται για 20 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου, με αποτέλεσμα την ανάπτυξη ενός
μπλε χρώμα. Η ανάπτυξη χρώματος διακόπτεται με την προσθήκη 1N HCl και η απορρόφηση μειώνεται.
μετρήθηκε φασματοφωτομετρικά στα 450 nm. Η ένταση του χρώματος που σχηματίζεται είναι ανάλογη με το
ποσότητα του υπάρχοντος ενζύμου και είναι αντιστρόφως ανάλογη με την ποσότητα των προτύπων που δοκιμάζονται με τον ίδιο τρόπο.
Μέσω σύγκρισης με την καμπύλη βαθμονόμησης που σχηματίζεται από τους παρεχόμενους βαθμονομητές, η συγκέντρωση του
Στη συνέχεια υπολογίζονται τα εξουδετερωτικά αντισώματα στο άγνωστο δείγμα.
【ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΑ ΑΛΛΑ ΔΕΝ ΠΑΡΕΧΟΝΤΑΙ ΥΛΙΚΑ】
1. Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό
2. Πιπέτες ακριβείας: 10μL, 100μL, 200μL και 1 mL
3. Ρύγχη πιπέτας μιας χρήσης
4. Συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας με δυνατότητα ανάγνωσης απορρόφησης στα 450nm.
5. Απορροφητικό χαρτί
6. Χαρτί γραφικών παραστάσεων
7. Αναδευτήρας Vortex ή ισοδύναμος
【ΣΥΛΛΟΓΗ ΚΑΙ ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ】
1. Για αυτό το κιτ μπορούν να χρησιμοποιηθούν δείγματα ορού και πλάσματος που συλλέγονται σε σωληνάρια που περιέχουν K2-EDTA.
2. Τα δείγματα πρέπει να είναι πωματισμένα και μπορούν να αποθηκευτούν για έως και 48 ώρες στους 2 °C - 8 °C πριν από την ανάλυση.
Τα δείγματα που διατηρούνται για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα (έως 6 μήνες) θα πρέπει να καταψύχονται μόνο μία φορά στους -20 °C πριν από την ανάλυση.
Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης-απόψυξης.
ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΟ
【Παρασκευή αντιδραστηρίου】
1. Όλα τα αντιδραστήρια πρέπει να βγαίνουν από το ψυγείο και να αφήνονται να επανέλθουν σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση.
(20° έως 25°C). Φυλάξτε όλα τα αντιδραστήρια στο ψυγείο αμέσως μετά τη χρήση.
2. Όλα τα δείγματα και οι μάρτυρες θα πρέπει να αναμιγνύονται με στροβιλισμό πριν από τη χρήση.
3. Παρασκευή διαλύματος hACE2-HRP: Αραιώστε το συμπύκνωμα hACE2-HRP σε αναλογία αραίωσης 1:51 με αραίωση
Ρυθμιστικό διάλυμα. Για παράδειγμα, αραιώστε 100 μL συμπυκνώματος hACE2-HRP με 5,0 mL ρυθμιστικού διαλύματος αραίωσης HRP για να
παρασκευάστε ένα διάλυμα hACE2-HRP.
4. Παρασκευή διαλύματος πλύσης 1×: Αραιώστε το διάλυμα πλύσης 20× με απιονισμένο ή απεσταγμένο νερό με
αναλογία όγκου 1:19. Για παράδειγμα, αραιώστε 20 mL διαλύματος πλύσης 20× με 380 mL απιονισμένου ή
απεσταγμένο νερό για να παρασκευάσετε 400 mL διαλύματος πλύσης 1×.
【Διαδικασία δοκιμής】
1. Σε ξεχωριστά σωληνάρια, διανείμετε 120 μL του παρασκευασμένου διαλύματος hACE2-HRP.
2. Προσθέστε 6 μL βαθμονομητών, άγνωστων δειγμάτων, μαρτύρων ποιότητας σε κάθε σωληνάριο και ανακατέψτε καλά.
3. Μεταφέρετε 100 μL από κάθε μείγμα που παρασκευάστηκε στο βήμα 2 στα αντίστοιχα φρεάτια μικροπλάκας σύμφωνα με
σε προσχεδιασμένη διαμόρφωση δοκιμής.
3. Καλύψτε την πλάκα με σφραγιστικό πλάκας και επωάστε την στους 37°C για 30 λεπτά.
4. Αφαιρέστε το σφραγιστικό πλάκας και πλύνετε την πλάκα με περίπου 300 μL 1× διαλύματος πλύσης ανά φρεάτιο τέσσερις φορές.
5. Χτυπήστε ελαφρά την πλάκα σε χαρτί κουζίνας για να αφαιρέσετε το υπολειμματικό υγρό από τις κοιλότητες μετά τα βήματα πλύσης.
6. Προσθέστε 100 μL διαλύματος TMB σε κάθε πηγαδάκι και επωάστε την πλάκα στο σκοτάδι στους 20-25°C για 20 λεπτά.
7. Προσθέστε 50 μL διαλύματος διακοπής σε κάθε πηγάδι για να σταματήσετε την αντίδραση.
8. Διαβάστε την απορρόφηση σε συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας στα 450 nm εντός 10 λεπτών (630 nm ως αξεσουάρ είναι
συνιστάται για απόδοση υψηλότερης ακρίβειας).