Комплет за детекција на неутрализирачки антитела за SARS-CoV-2 (ELISA) од Testsealabs
Краток опис:
Касетата за тестирање на неутрализирачки антитела за SARS-CoV-2 е брз хроматографски имунотест. Овој тест е дизајниран за квалитативно откривање на неутрализирачки антитела против коронавирусната болест 2019. Може да се користи со примероци од човечка цела крв, серум или плазма. Тестот служи како помош при проценка на нивоата на титри на човечки неутрализирачки антитела против новиот коронавирус.
 Брзи резултати: Лабораториски точни за неколку минути | Прецизност од лабораториски квалитет: Сигурна и доверлива |
| Тестирајте насекаде: Не е потребна посета на лабораторија | Сертифициран квалитет: 13485, CE, усогласено со Mdsap |
| Едноставно и поедноставно: Лесно за користење, без мака | Максимална практичност: Тестирајте удобно дома |
【ПРИНЦИП】
Комплетот за детекција на неутрализирачки антитела на SARS-CoV-2 е базиран на конкурентна ELISA методологија.
Користење на прочистен домен за врзување на рецепторот (RBD), протеин од протеинот на вирусниот шилест (S) и клетката домаќин
рецептор ACE2, овој тест е дизајниран да ја имитира неутрализирачката интеракција вирус-домаќин.
Калибраторите, контролите за квалитет и примероците од серум или плазма се добро мешаат индивидуално во разредување.
пуфер што содржи hACE2-HRP конјугат аликвотиран во мали епрувети. Потоа смесите се пренесуваат во
микроплочките содржат имобилизиран рекомбинантен фрагмент RBD (RBD) од SARS-CoV-2 за
инкубација. За време на 30-минутната инкубација, RBD специфичното антитело во калибраторите, QC и
примероците ќе се натпреваруваат со hACE2-HRP за специфично врзување на RBD имобилизиран во бунарите.
инкубацијата, бунарите се мијат 4 пати за да се отстрани неврзаниот hACE2-HRP конјугат. Раствор од
Потоа се додава TMB и се инкубира 20 минути на собна температура, што резултира со развој на
сина боја. Развивањето на бојата се запира со додавање на 1N HCl, а апсорпцијата е
мерено спектрофотометриски на 450 nm. Интензитетот на формираната боја е пропорционален на
количината на присутен ензим и е обратно пропорционална на количината на стандарди анализирани на ист начин.
Преку споредба со калибрациската крива формирана од обезбедените калибратори, концентрацијата на
потоа се пресметуваат неутрализирачките антитела во непознатиот примерок.
【ПОТРЕБНИ МАТЕРИЈАЛИ, НО НЕ СЕ ОБЕЗБЕДЕНИ】
1. Дестилирана или дејонизирана вода
2. Прецизни пипети: 10μL, 100μL, 200μL и 1 mL
3. Врвови за пипети за еднократна употреба
4. Читач на микроплочки способен за отчитување на апсорпција на 450 nm.
5. Впивлива хартија
6. Милиметарска хартија
7. Вортекс миксер или еквивалент
【СОБИРАЊЕ И СКЛАДИРАЊЕ НА ПРИМЕРОЦИ】
1. За овој комплет може да се користат примероци од серум и плазма собрани во епрувети што содржат K2-EDTA.
2. Примероците треба да бидат затворени и може да се чуваат до 48 часа на 2 °C - 8 °C пред анализата.
Примероците што се чуваат подолго време (до 6 месеци) треба да се замрзнат само еднаш на -20 °C пред анализата.
Избегнувајте повторени циклуси на замрзнување-одмрзнување.
ПРОТОКОЛ
【Подготовка на реагенс】
1. Сите реагенси мора да се извадат од фрижидер и да се остават да се вратат на собна температура пред употреба.
(20° до 25°C). Сите реагенси чувајте ги во фрижидер веднаш по употреба.
2. Сите примероци и контроли треба да се промешаат во вртежен момент пред употреба.
3. Подготовка на растворот hACE2-HRP: Разредете го концентратот hACE2-HRP во сооднос на разредување 1:51 со разредување
Пуфер. На пример, разредете 100 μL концентрат од hACE2-HRP со 5,0 mL пуфер за разредување на HRP за да
направете раствор од hACE2-HRP.
4. Подготовка на раствор за перење 1×: Разредете го растворот за перење 20× со дејонизирана или дестилирана вода со
волуменски сооднос од 1:19. На пример, разредете 20 mL од растворот за перење 20× со 380 mL дејонизиран или
дестилирана вода за да се направат 400 мл раствор за перење 1×.
【Постапка за тестирање】
1. Во посебни епрувети, аликвотирајте 120 μL од подготвениот раствор hACE2-HRP.
2. Додадете 6 μL калибратори, непознати примероци, контроли на квалитет во секоја епрувета и добро измешајте.
3. Пренесете 100 μL од секоја смеса подготвена во чекор 2 во соодветните бунари на микроплочката според
до претходно дизајнирана конфигурација за тестирање.
3. Покријте ја плочата со средство за запечатување на плочи и инкубирајте на 37°C 30 минути.
4. Отстранете го средството за запечатување на плочите и измијте ја плочата со приближно 300 μL од 1× раствор за миење по бунар четири пати.
5. Удрете ја плочата на хартиена крпа за да ја отстраните преостанатата течност во вдлабнатините по чекорите на миење.
6. Додадете 100 μL раствор од TMB во секоја бунарче и инкубирајте ја плочата на темно место на 20 - 25°C во тек на 20 минути.
7. Додадете 50 μL раствор за стопирање во секоја бунарче за да ја запрете реакцијата.
8. Прочитајте ја апсорпцијата во читачот на микроплочки на 450 nm во рок од 10 минути (630 nm како додаток е
се препорачува за перформанси со поголема прецизност).