SARS-COV-2 Kit Neutralizues i Antitrupave të Zbulimit të Antitrupave (ELISA)
【Përdorimi i synuar】
SARS-COV-2 kompleti i zbulimit të antitrupave neutralizues është një analizë konkurruese e imunosorbentit të lidhur me enzimën (ELISA) të destinuar për zbulimin cilësor dhe gjysmë sasior të antitrupave neutralizues të antitrupave SARS-COV-2 në serumin njerëzor dhe plazmën. Kompleti i zbulimit të antitrupave neutralizues Sars- cov-2 mund të përdoret si një ndihmë në identifikimin e individëve me një përgjigje imune adaptive ndaj SARS- COV-2, duke treguar infeksionin e fundit ose të mëparshëm. Kompleti i zbulimit të antitrupave neutralizues SARS-COV-2 nuk duhet të përdoret për të diagnostikuar infeksionin akut SARS-COV-2.
【Prezantim】
Infeksionet e koronavirusit zakonisht shkaktojnë përgjigje neutralizuese të antitrupave. Shkalla e serokonversionit në pacientët COVID-19 janë përkatësisht 50% dhe 100% në ditën e 7 dhe 14 pas fillimit të simptomave. Për të paraqitur njohuri, antitrupi përkatës i virusit neutralizues në gjak është i njohur si një objektiv për përcaktimin e efikasitetit të antitrupave dhe përqendrimi më i lartë i antitrupave neutralizues tregojnë efikasitet më të lartë të mbrojtjes. Testi i neutralizimit të zvogëlimit të pllakës (PRNT) është njohur si standard i artë për zbulimin e antitrupave neutralizues. Sidoqoftë, për shkak të xhiros së tij të ulët dhe kërkesës më të lartë për operim, PRNT nuk është praktike për serodiagnozën në shkallë të gjerë dhe vlerësimin e vaksinave. Kompleti i zbulimit të antitrupave neutralizues SARS-COV-2 bazohet në metodologjinë konkurruese të analizës imunosorbente të lidhur me enzimën (ELISA), e cila mund të zbulojë antitrupin neutralizues në mostrën e gjakut, si dhe të qaseni posaçërisht në nivelet e përqendrimit të këtij lloji të antitrupave.
【Procedurë e provës】
1.Në tuba të veçantë, Aliquot 120 μl të zgjidhjes së përgatitur HACE2-HRP.
2. Shtoni 6 μl të kalibruesve, mostra të panjohura, kontrolle të cilësisë në secilin tub dhe përzihen mirë.
3. Transferimi 100 μl i secilës përzierje të përgatitur në hapin 2 në puset e mikroplatit përkatës sipas konfigurimit të parashikuar të testit.
3. Mbrapni pllakën me mbyllës të pllakës dhe inkuboni në 37 ° C për 60 minuta.
4. Largoni mbyllësin e pllakës dhe lani pllakën me 300 μl të përafërt të zgjidhjes së larjes 1 × për pus për katër herë.
5.Tap pllakën në peshqir letre për të hequr lëngun e mbetur në puse pas hapave të larjes.
6. Shtoni 100 μl zgjidhje TMB për secilën pus dhe inkuboni pllakën në errësirë në 20 - 25 ° C për 20 minuta.
7. Shtoni 50 μl zgjidhje ndalimi për secilin pus për të ndaluar reagimin.
8. Lexoni absorbimin në lexuesin e mikroplateve në 450 nm brenda 10 minutave (630Nm pasi aksesori rekomandohet për performancë më të lartë precize.