SARS-COV-2 Zestaw wykrywania przeciwciał （ELISA)
【Zamierzone użycie】
SARS-COV-2 neutralizujący zestaw do wykrywania przeciwciał jest konkurencyjnym enzymem testy immunosorbent (ELISA) przeznaczonego do jakościowego i półilościowego wykrywania całkowitej neutralizującej przeciwciał do SARS-COV-2 w surowicy ludzkiej i osoczu. Zestaw neutralizujący przeciwciała SARS-COV-2 może być wykorzystany jako pomoc w identyfikacji osób z adaptacyjną odpowiedzią immunologiczną na SARS-COV-2, wskazując na ostatnią lub wcześniejszą infekcję. Zestaw neutralizujących przeciwciała SARS-COV-2 nie powinien być stosowany do zdiagnozowania ostrej infekcji SARS-COV-2.
【WSTĘP】
Zakażenia koronawirusa zwykle indukują neutralizujące odpowiedzi przeciwciał. Wskaźniki serokonwersji u pacjentów z Covid-19 wynoszą odpowiednio 50% i 100% w dniu 7 i 14 po objawie. Aby przedstawić wiedzę, odpowiednie przeciwciało neutralizujące wirusa we krwi jest uznane za cel określania skuteczności przeciwciał, a wyższe stężenie przeciwciała neutralizującego wskazują na wyższą skuteczność ochrony. Test neutralizacji redukcji płytki (PRNT) został uznawany za złoty standard wykrywania przeciwciał neutralizujących. Jednak ze względu na niską przepustowość i wyższe wymagania dotyczące eksploatacji PRNT nie jest praktyczne w przypadku serodiagnozy na dużą skalę i oceny szczepionki. Zestaw neutralizujących neutralizującego przeciwciał SARS-COV-2 oparty jest na konkurencyjnej metodologii testu immunosorbentowego (ELISA), który może wykryć neutralizujące przeciwciało w próbce krwi, a także specjalnie uzyskiwać dostęp do poziomów stężenia tego typu przeciwciała.
【Procedura testowa】
1. W oddzielnych rurkach Aliquot 120 μl przygotowanego roztworu HACE2-HRP.
2. Dodaj 6 μl kalibratorów, nieznane próbki, kontrole jakości w każdej rurce i dobrze wymieszaj.
3. Transfer 100 μl każdej mieszaniny przygotowanej w kroku 2 do odpowiednich studzienek mikropłytkowych zgodnie z precyzyjną konfiguracją testu.
3. Przejdź płytkę z uszczelnieniem płytki i inkubuj w 37 ° C przez 60 minut.
4. Zrób uszczelnienie płytki i umyj płytkę przy około 300 μl 1 × roztworu przemycia na studnię cztery razy.
5. Wprowadź płytkę na ręczniku papierowym, aby usunąć resztkowy ciecz w studniach po schodach.
6. Dodaj 100 μl roztworu TMB do każdej studzienki i inkubuj płytkę w ciemności w 20–25 ° C przez 20 minut.
7. Dodaj 50 μl roztworu stop do każdej studni, aby zatrzymać reakcję.
8. Przeczytaj absorbancję w czytniku mikropłytek przy 450 nm w ciągu 10 minut (630 Nm jako akcesorium jest zalecane dla wyższej wydajności precyzyjnej.
