Zestaw do wykrywania przeciwciał neutralizujących SARS-CoV-2 (ELISA) firmy Testsealabs
Krótki opis:
Kaseta z testem przeciwciał neutralizujących SARS-CoV-2 to szybki chromatograficzny test immunoenzymatyczny. Test ten jest przeznaczony do jakościowego wykrywania przeciwciał neutralizujących przeciwko chorobie koronawirusowej 2019. Można go stosować z próbkami krwi pełnej, surowicy lub osocza ludzkiego. Test służy jako pomoc w ocenie poziomu miana ludzkich przeciwciał neutralizujących przeciwko nowemu koronawirusowi.
 Szybkie wyniki: laboratoryjna dokładność w ciągu kilku minut | Precyzja laboratoryjna: niezawodna i godna zaufania |
| Testuj w dowolnym miejscu: bez konieczności wizyty w laboratorium | Certyfikowana jakość: 13485, CE, zgodność z MDSAPA |
| Proste i usprawnione: łatwe w użyciu, bezproblemowe | Najwyższa wygoda: testuj wygodnie w domu |
【ZASADA】
Zestaw do wykrywania przeciwciał neutralizujących SARS-CoV-2 oparty jest na konkurencyjnej metodologii ELISA.
Wykorzystując oczyszczoną domenę wiążącą receptor (RBD), białko z białka kolca wirusowego (S) i komórkę gospodarza
receptor ACE2, test ten ma naśladować neutralizującą interakcję wirusa z gospodarzem.
Kalibratory, kontrole jakości oraz próbki surowicy lub osocza są dokładnie mieszane pojedynczo w rozcieńczeniu
bufor zawierający koniugat hACE2-HRP podzielony na alikwoty w małych probówkach. Następnie mieszaniny są przenoszone do
studzienki mikropłytki zawierające unieruchomiony rekombinowany fragment RBD SARS-CoV-2 (RBD)
inkubacji. Podczas 30-minutowej inkubacji przeciwciało specyficzne dla RBD w kalibratorach, QC i
Próbki będą konkurować z hACE2-HRP o specyficzne wiązanie RBD unieruchomionego w studzienkach. Po
Podczas inkubacji studzienki przemywa się 4 razy, aby usunąć niezwiązany koniugat hACE2-HRP. Roztwór
Następnie dodaje się TMB i inkubuje przez 20 minut w temperaturze pokojowej, co powoduje powstanie
kolor niebieski. Rozwój koloru zostaje zatrzymany przez dodanie 1N HCl, a absorbancja jest
mierzona spektrofotometrycznie przy 450 nm. Intensywność powstałego koloru jest proporcjonalna do
ilość obecnego enzymu i jest odwrotnie proporcjonalna do ilości badanych w ten sam sposób standardów.
Poprzez porównanie z krzywą kalibracyjną utworzoną przez dostarczone kalibratory, stężenie
Następnie oblicza się przeciwciała neutralizujące w nieznanej próbce.
【MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE DOSTARCZONE】
1. Woda destylowana lub dejonizowana
2. Pipety precyzyjne: 10 μL, 100 μL, 200 μL i 1 ml
3. Jednorazowe końcówki do pipet
4. Czytnik mikropłytek umożliwiający odczyt absorbancji przy długości fali 450 nm.
5. Papier chłonny
6. Papier milimetrowy
7. Mieszadło wirowe lub równoważne
【POBIERANIE I PRZECHOWYWANIE PRÓBEK】
1. Do tego zestawu można używać próbek surowicy i osocza pobranych w probówkach zawierających K2-EDTA.
2. Próbki należy zamknąć korkami i przechowywać do 48 godzin w temperaturze 2°C - 8°C przed wykonaniem badań.
Próbki przechowywane przez dłuższy czas (do 6 miesięcy) należy zamrozić tylko raz w temperaturze -20 °C przed wykonaniem analizy.
Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania.
PROTOKÓŁ
【Przygotowanie odczynników】
1. Wszystkie odczynniki należy wyjąć z lodówki i pozostawić do ogrzania do temperatury pokojowej przed użyciem.
(20° do 25°C). Po użyciu przechowywać wszystkie odczynniki w lodówce.
2. Wszystkie próbki i kontrole należy przed użyciem zawirować.
3. Przygotowanie roztworu hACE2-HRP: Rozcieńczyć koncentrat hACE2-HRP w stosunku rozcieńczenia 1:51 za pomocą preparatu Dilution
Bufor. Na przykład rozcieńczyć 100 μl koncentratu hACE2-HRP 5,0 ml buforu rozcieńczającego HRP, aby
przygotować roztwór hACE2-HRP.
4. 1× Przygotowanie roztworu do płukania: Rozcieńczyć roztwór do płukania 20× wodą dejonizowaną lub destylowaną.
stosunek objętości 1:19. Na przykład rozcieńczyć 20 ml 20-krotnego roztworu płuczącego 380 ml dejonizowanego lub
wody destylowanej w celu przygotowania 400 ml 1× roztworu do płukania.
【Procedura testowa】
1. Do oddzielnych probówek odmierz po 120 μl przygotowanego roztworu hACE2-HRP.
2. Do każdej probówki dodać po 6 μL kalibratorów, próbek nieznanych oraz kontroli jakości i dokładnie wymieszać.
3. Przenieść 100 μl każdej mieszaniny przygotowanej w kroku 2 do odpowiednich dołków mikropłytki zgodnie z
do wstępnie zaprojektowanej konfiguracji testowej.
3. Przykryj płytkę folią uszczelniającą i inkubuj w temperaturze 37°C przez 30 minut.
4. Zdjąć uszczelkę płytki i przemyć płytkę cztery razy, używając około 300 μl 1× roztworu do przemywania na dołek.
5. Po umyciu należy postukać płytką o ręcznik papierowy, aby usunąć resztki płynu z dołków.
6. Dodać 100 μl roztworu TMB do każdego dołka i inkubować płytkę w ciemności w temperaturze 20–25°C przez 20 minut.
7. Aby zatrzymać reakcję, do każdego dołka należy dodać 50 μl roztworu zatrzymującego.
8. Odczytaj absorbancję w czytniku mikropłytek przy 450 nm w ciągu 10 minut (630 nm jako akcesorium jest dostępne).
zalecane dla uzyskania większej precyzji działania).