SARS-COV-2 Kit de detectare a anticorpilor neutralizanți (ELISA)
【Utilizarea intenționată】
Kitul de detectare a anticorpilor de neutralizare SARS-CoV-2 este un test imunosorbent legat de enzimă (ELISA), destinat detectării calitative și semi-cantitative a anticorpilor de neutralizare totale la SARS-CoV-2 în serul uman și în plasmă. Kitul de detectare a anticorpilor de neutralizare SARS-COV-2 poate fi utilizat ca ajutor în identificarea persoanelor cu un răspuns imun adaptativ la SARS- COV-2, indicând o infecție recentă sau anterioară. Setul de detectare a anticorpilor de neutralizare SARS-CoV-2 nu trebuie utilizat pentru a diagnostica infecția cu SARS-CoV-2 acută.
【INTRODUCERE】
Infecțiile cu coronavirus induc de obicei răspunsuri de anticorpi neutralizante. Ratele de seroconversie la pacienții cu COVID-19 sunt de 50% și 100% în ziua 7 și, respectiv, la 14 după apariția simptomelor. Pentru a prezenta cunoștințe, anticorpul neutralizant al virusului corespunzător în sânge este recunoscut ca țintă pentru determinarea eficacității anticorpului și concentrația mai mare a anticorpului neutralizant indică o eficacitate mai mare de protecție. Testul de neutralizare a reducerii plăcii (PRNT) a fost recunoscut ca standard de aur pentru detectarea anticorpilor de neutralizare. Cu toate acestea, datorită debitului său scăzut și a cerinței mai mari pentru funcționare, PRNT nu este practic pentru serodiagnosticul la scară largă și evaluarea vaccinului. Kitul de detectare a anticorpilor de neutralizare SARS-CoV-2 se bazează pe metodologia testului imunosorbent (ELISA) legat de enzimă (ELISA), care poate detecta anticorpul neutralizant în proba de sânge, precum și accesul special la nivelurile de concentrație ale acestui tip de anticorp.
【Procedura de testare】
1. În tuburi separate, alicotă 120 µl din soluția HACE2-HRP preparată.
2.Add 6 µl de calibratoare, probe necunoscute, controale de calitate în fiecare tub și se amestecă bine.
3.Transfer 100 µl din fiecare amestec preparat în etapa 2 în puțuri de microplate corespunzătoare conform configurației testului predesemnat.
3. Acoperiți placa cu etanșarea plăcii și incubați la 37 ° C timp de 60 de minute.
4. Rețineți etanșarea plăcii și spălați placa cu aproximativ 300 µl de 1 × soluție de spălare pe godeu de patru ori.
5. Atacați farfuria de pe prosopul de hârtie pentru a îndepărta lichidul rezidual în puțuri după pașii de spălare.
6.ADD 100 µL de soluție TMB la fiecare godeu și incubați placa în întuneric la 20 - 25 ° C timp de 20 de minute.
7.ADD 50 µL de soluție de oprire la fiecare godeu pentru a opri reacția.
8. Citiți absorbția în cititorul de microplate la 450 nm în 10 minute (630 nm ca accesoriu este recomandat pentru performanțe de precizie mai mare.