Kit de detectare a anticorpilor neutralizanți pentru SARS-CoV-2 (ELISA) Testsealabs
Scurtă descriere:
Testul în casetă pentru anticorpi neutralizanți SARS-CoV-2 este un test imunocromatografic rapid. Acest test este conceput pentru detectarea calitativă a anticorpilor neutralizanți împotriva bolii Coronavirus 2019. Poate fi utilizat cu probe de sânge integral uman, ser sau plasmă. Testul servește ca ajutor în evaluarea nivelurilor de titruri de anticorpi neutralizanți anti-noul coronavirus uman.
 Rezultate rapide: Precizie de laborator în câteva minute | Precizie de laborator: Fiabilă și de încredere |
| Testați oriunde: Nu este necesară o vizită la laborator | Calitate certificată: 13485, CE, conform Mdsap |
| Simplu și eficientizat: ușor de utilizat, fără probleme | Comoditate maximă: Testați confortabil acasă |
【PRINCIPIU】
Kitul de detectare a anticorpilor neutralizanți pentru SARS-CoV-2 se bazează pe metodologia ELISA competitivă.
Folosind domeniul de legare a receptorului purificat (RBD), proteina din proteina spike virală (S) și celula gazdă
receptorul ACE2, acest test este conceput pentru a imita interacțiunea de neutralizare virus-gazdă.
Calibratorii, controalele de calitate și probele de ser sau plasmă sunt bine amestecate individual în diluție.
tampon conținând conjugat hACE2-HRP, împărțit în tuburi mici. Apoi, amestecurile sunt transferate în
godeurile microplăcii care conțin fragmentul RBD (RBD) recombinant imobilizat de SARS-CoV-2 pentru
incubare. În timpul incubării de 30 de minute, anticorpul specific RBD din calibratoare, QC și
probele vor concura cu hACE2-HRP pentru legarea specifică a RBD imobilizat în godeuri. După
În timpul incubării, godeurile sunt spălate de 4 ori pentru a îndepărta conjugatul hACE2-HRP nelegat. O soluție de
Apoi se adaugă TMB și se incubează timp de 20 de minute la temperatura camerei, rezultând dezvoltarea unei
culoare albastră. Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea de HCl 1N, iar absorbanța este
măsurată spectrofotometric la 450 nm. Intensitatea culorii formate este proporțională cu
cantitatea de enzimă prezentă și este invers proporțională cu cantitatea de standarde analizate în același mod.
Prin comparație cu curba de calibrare formată de calibratorii furnizați, concentrația de
Se calculează apoi anticorpii neutralizanți din proba necunoscută.
【MATERIALE NECESARE, DAR NEFURNITE】
1. Apă distilată sau deionizată
2. Pipete de precizie: 10 μL, 100 μL, 200 μL și 1 mL
3. Vârfuri de pipetă de unică folosință
4. Cititor de microplăci capabil să citească absorbanța la 450 nm.
5. Hârtie absorbantă
6. Hârtie milimetrică
7. Mixer vortex sau echivalent
【COLECTAREA ȘI DEPOZITAREA SPECIMENULUI】
1. Probele de ser și plasmă colectate în tuburi care conțin K2-EDTA pot fi utilizate pentru acest kit.
2. Probele trebuie închise cu capac și pot fi păstrate până la 48 de ore la 2 °C - 8 °C înainte de testare.
Probele păstrate pentru o perioadă mai lungă de timp (până la 6 luni) trebuie congelate o singură dată la -20 °C înainte de testare.
Evitați ciclurile repetate de îngheț-dezgheț.
PROTOCOL
【Prepararea reactivilor】
1. Toți reactivii trebuie scoși din frigider și lăsați să revină la temperatura camerei înainte de utilizare.
(20° până la 25°C). Păstrați toți reactivii în frigider imediat după utilizare.
2. Toate probele și controalele trebuie vortexate înainte de utilizare.
3. Prepararea soluției hACE2-HRP: Diluați concentratul hACE2-HRP într-un raport de diluție de 1:51 cu soluția de diluție.
Soluție tampon. De exemplu, diluați 100 μL de concentrat hACE2-HRP cu 5,0 ml de soluție tampon de diluție HRP pentru a
preparați o soluție hACE2-HRP.
4. Prepararea soluției de spălare 1×: Diluați soluția de spălare 20× cu apă deionizată sau distilată cu un
raport volumetric de 1:19. De exemplu, diluați 20 ml de soluție de spălare 20× cu 380 ml de soluție deionizată sau
apă distilată pentru a prepara 400 ml de soluție de spălare 1×.
【Procedura de testare】
1. În tuburi separate, se prelevează o porție de 120 μL din soluția hACE2-HRP preparată.
2. Adăugați 6 μL de calibratori, probe necunoscute, controale de calitate în fiecare eprubetă și amestecați bine.
3. Transferați 100 μL din fiecare amestec preparat în etapa 2 în godeurile corespunzătoare ale microplăcii, conform instrucțiunilor.
la configurația de testare preconcepută.
3. Acoperiți placa cu substanță de etanșare pentru plăci și incubați la 37°C timp de 30 de minute.
4. Scoateți dispozitivul de etanșare a plăcii și spălați placa cu aproximativ 300 μL de soluție de spălare 1× per godeu de patru ori.
5. Loviți placa ușor de un prosop de hârtie pentru a îndepărta lichidul rezidual din godeuri după pașii de spălare.
6. Adăugați 100 μL de soluție TMB în fiecare godeu și incubați placa la întuneric la 20 - 25°C timp de 20 de minute.
7. Adăugați 50 μL de soluție de oprire în fiecare godeu pentru a opri reacția.
8. Citiți absorbanța în cititorul de microplăci la 450 nm în decurs de 10 minute (630 nm este accesoriu inclus).
recomandat pentru performanțe de precizie mai ridicate).