Набір для виявлення нейтралізуючих антитіл до SARS-CoV-2 (ІФА) від Testsealabs
Короткий опис:
Касета для тестування на нейтралізуючі антитіла до SARS-CoV-2 – це швидкий імунохроматографічний аналіз. Цей аналіз призначений для якісного виявлення нейтралізуючих антитіл проти коронавірусної хвороби 2019. Його можна використовувати зі зразками цільної крові, сироватки або плазми людини. Тест служить допоміжним засобом для оцінки рівнів титрів нейтралізуючих антитіл людини до нового коронавірусу.
 Швидкі результати: лабораторна точність за лічені хвилини | Лабораторна точність: надійність та достовірність |
| Тестування будь-де: відвідування лабораторії не потрібне | Сертифікована якість: 13485, CE, сумісний з Mdsap |
| Простий та оптимізований: легкий у використанні, без зайвих клопотів | Найвища зручність: комфортне тестування вдома |
【ПРИНЦИП】
Набір для виявлення нейтралізуючих антитіл до SARS-CoV-2 базується на методології конкурентного ІФА.
Використовуючи очищений рецептор-зв'язуючий домен (RBD), білок з вірусного шипоподібного (S) білка та клітину-хазяїна
рецептор АПФ2, цей тест розроблений для імітації нейтралізуючої взаємодії вірус-господар.
Калібратори, контролі якості та зразки сироватки або плазми окремо добре змішуються в розведеному вигляді.
буфер, що містить кон'югат hACE2-HRP, розподілений по аліквотах у невеликі пробірки. Потім суміші переносять у
лунки мікропланшета, що містять іммобілізований рекомбінантний фрагмент RBD (RBD) SARS-CoV-2 для
інкубація. Протягом 30-хвилинної інкубації специфічні антитіла до RBD у калібраторах, контролі якості та
зразки конкуруватимуть з hACE2-HRP за специфічне зв'язування з RBD, іммобілізованим у лунках. Після
Під час інкубації лунки промивають 4 рази для видалення незв'язаного кон'югату hACE2-HRP. Розчин
Потім додають ТМБ та інкубують протягом 20 хвилин за кімнатної температури, що призводить до розвитку
синій колір. Розвиток кольору зупиняється додаванням 1N HCl, а поглинання
вимірюється спектрофотометрично при 450 нм. Інтенсивність утвореного кольору пропорційна
кількість присутнього ферменту та обернено пропорційна кількості стандартів, аналізованих таким самим чином.
Шляхом порівняння з калібрувальною кривою, сформованою наданими калібраторами, концентрація
Потім розраховується кількість нейтралізуючих антитіл у невідомому зразку.
【НЕОБХІДНІ МАТЕРІАЛИ, ЯКІ НЕ НАДАЮТЬСЯ】
1. Дистильована або деіонізована вода
2. Прецизійні піпетки: 10 мкл, 100 мкл, 200 мкл та 1 мл
3. Одноразові наконечники для піпеток
4. Рідер мікропланшетів, здатний зчитувати поглинання при 450 нм.
5. Абсорбуючий папір
6. Міліметровий папір
7. Вихровий змішувач або еквівалент
【ЗБІР ТА ЗБЕРІГАННЯ ЗРАЗКІВ】
1. Для цього набору можна використовувати зразки сироватки та плазми, зібрані в пробірки, що містять K2-EDTA.
2. Зразки слід закривати кришками та зберігати до 48 годин при температурі від 2 °C до 8 °C перед аналізом.
Зразки, що зберігаються протягом тривалого часу (до 6 місяців), слід заморожувати лише один раз при температурі -20 °C перед аналізом.
Уникайте повторних циклів заморожування-розморожування.
ПРОТОКОЛ
【Підготовка реагенту】
1. Усі реагенти необхідно вийняти з холодильника та дати їм нагрітися до кімнатної температури перед використанням.
(від 20° до 25°C). Зберігайте всі реагенти в холодильнику одразу після використання.
2. Усі зразки та контролі слід перемішати у вортексі перед використанням.
3. Приготування розчину hACE2-HRP: Розведіть концентрат hACE2-HRP у співвідношенні 1:51 розчином Dilution
Буфер. Наприклад, розведіть 100 мкл концентрату hACE2-HRP з 5,0 мл буфера для розведення HRP до
приготуйте розчин hACE2-HRP.
4. Приготування 1× промивного розчину: Розведіть 20× промивний розчин деіонізованою або дистильованою водою за допомогою
об'ємне співвідношення 1:19. Наприклад, розведіть 20 мл розчину для промивання 20× з 380 мл деіонізованої або
дистильованої води для приготування 400 мл розчину для промивання 1×.
【Процедура випробування】
1. В окремі пробірки відберіть аліквоти по 120 мкл підготовленого розчину hACE2-HRP.
2. Додайте 6 мкл калібраторів, невідомих зразків, контролів якості в кожну пробірку та добре перемішайте.
3. Перенесіть по 100 мкл кожної суміші, приготовленої на кроці 2, у відповідні лунки мікропланшета згідно з інструкцією.
до попередньо розробленої конфігурації тестування.
3. Накрийте планшет герметиком для планшетів та інкубуйте при температурі 37°C протягом 30 хвилин.
4. Зніміть герметик для планшета та промийте планшет приблизно 300 мкл розчину для промивання 1× на лунку протягом чотирьох разів.
5. Після промивання постукайте планшетом об паперовий рушник, щоб видалити залишки рідини з лунок.
6. Додайте 100 мкл розчину TMB до кожної лунки та інкубуйте планшет у темряві при температурі 20-25°C протягом 20 хвилин.
7. Додайте 50 мкл стоп-розчину в кожну лунку, щоб зупинити реакцію.
8. Зчитайте абсорбцію на мікропланшетному рідері при 450 нм протягом 10 хвилин (630 нм як додатковий прилад).
рекомендовано для вищої точності роботи).